檢測項目:抗生(shēng)素
适用(yòng)样本(běn):動(dòng)物(wù)組織、雞蛋、猪尿等样本(běn)
本(běn)试劑盒是(shì)應(yìng)用(yòng)ELISA技术研發(fà)而(ér)成(chéng)的(de)檢測产品,具有快(kuài)速、簡便、準确和(hé)靈敏度(dù)高(gāo)等优點(diǎn),操作(zuò)时(shí)間(jiān)需45min,能(néng)減少(shǎo)操作(zuò)誤差和(hé)工作(zuò)強(qiáng)度(dù)。
1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū),置于(yú)室(shì)温(wēn)(20~25℃)平衡30min以(yǐ)上(shàng),注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。若试劑中(zhōng)有晶體(tǐ)析出(chū),回(huí)温(wēn)溶解(jiě)後(hòu)方(fāng)可(kě)使用(yòng)。
2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆,将不(bù)用(yòng)的(de)微孔放(fàng)入(rù)锡(xī)箔袋(dài),保存于(yú)2~8℃。
3、洗涤液【配液1】在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。
4、編号(hào):将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào),每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo)準品做2孔平行,並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。
5、加标(biāo)準品/样本(běn):加标(biāo)準品或(huò)样本(běn)100μL/孔到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng),然後(hòu)加入(rù)四(sì)环(huán)素類(lèi)酶标(biāo)物(wù)50μL/孔,再加入(rù)四(sì)环(huán)素類(lèi)抗试劑50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置于(yú)25℃避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)30min。
6、洗闆:小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜,将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn),用(yòng)洗涤液【配液1】250μL/孔,充分(fēn)洗涤4~5次(cì),每次(cì)間(jiān)隔10s,用(yòng)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)拍干(gàn)(拍干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破)。
7、顯色(sè):加入(rù)底物(wù)液A液50μL/孔,再加底物(wù)液B液50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置于(yú)25℃避光(guāng)环(huán)境反(fǎn)應(yìng)15min。
8、測定(dìng):加入(rù)終(zhōng)止液50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú)450nm处(建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng)450/630nm檢測,請在(zài)5min內(nèi)读完數據(jù)),測定(dìng)每孔OD值。(若無酶标(biāo)儀,則不(bù)加終(zhōng)止液用(yòng)目測法可(kě)進(jìn)行判定(dìng))。