概要(yào) 

脫氧雪(xuě)腐鐮刀(dāo)菌烯醇（DeoxynivaLenoL）又稱嘔吐毒素 （Vomitoxin）屬于(yú)黴菌的(de)單端孢菌素族，由(yóu)某些(xiē)鐮刀(dāo)黴真(zhēn)菌屬产生(shēng)。嘔吐毒素多(duō)分(fēn)布(bù)于(yú)小麥、大(dà)麥、玉(yù)米(mǐ)等谷物(wù)籽實(shí)样本(běn)中(zhōng)，由(yóu)于(yú)其(qí)具有強(qiáng)的(de)细(xì)胞毒性(xìng)及免疫抑制性(xìng)質(zhì)，对(duì)人類(lèi)及動(dòng)物(wù)的(de)健康構成(chéng)威脅。 

本(běn)试劑盒是(shì)應(yìng)用(yòng)ELISA最(zuì)新(xīn)技术研發(fà)而(ér)成(chéng)的(de)毒素檢測产品，與(yǔ)儀器分(fēn)析技术相比具有快(kuài)速、簡便、準确和(hé)靈敏度(dù)高(gāo)等优點(diǎn)，操作(zuò)时(shí)間(jiān)需20min，能(néng)減少(shǎo)工作(zuò)強(qiáng)度(dù)和(hé)操作(zuò)誤差。 

實(shí)验原理(lǐ) 

本(běn)试劑盒采用(yòng)間(jiān)接競争ELISA 方(fāng)法，在(zài)酶标(biāo)闆微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)嘔吐毒素抗原，样本(běn)中(zhōng)的(de)嘔吐毒素和(hé)微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)的(de)抗 原競争嘔吐毒素抗體(tǐ)（抗试劑），同(tóng)时(shí)嘔吐毒素抗體(tǐ)與(yǔ)酶标(biāo)二(èr)抗（酶标(biāo)物(wù)）相結合，經(jīng)TMB 底物(wù)顯色(sè)，样本(běn)吸光(guāng)度(dù)值與(yǔ)其(qí)所含嘔吐毒素含量(liàng)呈負相關(guān)，與(yǔ)标(biāo)準曲(qū)線(xiàn)比較再乘以(yǐ)其(qí)对(duì)應(yìng)的(de)校(xiào)準系(xì)數，即可(kě)得出(chū)样本(běn)中(zhōng)嘔吐毒素的(de)含量(liàng)。 

貯藏条(tiáo)件(jiàn)及有效期(qī) 

貯藏条(tiáo)件(jiàn)：保存试劑盒于(yú) 2~8℃。 

有效期(qī)：該产品有效期(qī)为(wèi) 12 个(gè)月(yuè)。

1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū)，置于(yú)室(shì)温(wēn)（20~25℃）平 衡 1h 以(yǐ)上(shàng)，注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。 

2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆，将不(bù)用(yòng)的(de)微孔闆放(fàng)進(jìn)原锡(xī)箔袋(dài)中(zhōng) 並(bìng)且(qiě)與(yǔ)提(tí)供的(de)干(gàn)燥劑一(yī)起(qǐ)重(zhòng)新(xīn)密封(fēng)，保存于(yú) 2～8℃。切(qiè) 勿冷(lěng)凍。 

3、洗涤液在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。 

4、請注意(yì)反(fǎn)應(yìng)温(wēn)度(dù)不(bù)宜过(guò)高(gāo)，控制温(wēn)度(dù)在(zài) 20~25℃。 

5、編号(hào)：将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào)，每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo) 準品做 2 孔平行，並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置（建 議在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)验过(guò)程中(zhōng)，若使用(yòng) 8 道(dào)移液器則标(biāo)準品和(hé)样本(běn) 的(de)總(zǒng)量(liàng)不(bù)宜超过(guò) 48 个(gè)，即不(bù)宜超过(guò) 6 个(gè)檢測条(tiáo)；建議若 使用(yòng)單道(dào)移液器則不(bù)宜超过(guò) 16 个(gè)，即不(bù)宜超过(guò) 2 个(gè)檢測 条(tiáo)）。 

6、加标(biāo)準品/样本(běn)：加入(rù)标(biāo)準品或(huò)样本(běn) 50μL 到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng)， 加酶标(biāo)物(wù) 50μL /孔，再加入(rù)抗试劑 50μL /孔（加抗试劑时(shí) 請使用(yòng)多(duō)道(dào)移液器），輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置 25℃避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng) 15min。 

7、洗闆：小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜，将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn)，用(yòng)洗涤液 250μL /孔，充分(fēn)洗涤 4~5 次(cì)，每次(cì)間(jiān)隔 10s，在(zài)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)上(shàng)拍干(gàn)（拍 干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破）。 

8、顯色(sè)：加入(rù)底物(wù)液 100μL /孔（加底物(wù)液时(shí)請使用(yòng)多(duō)道(dào)移 液器），用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置 25℃避光(guāng)环(huán)境反(fǎn)應(yìng) 5min。 

9、測定(dìng)：加入(rù)終(zhōng)止液 50μL /孔（加終(zhōng)止液时(shí)請使用(yòng)多(duō)道(dào)移液 器），輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú) 450nm 处（建議用(yòng) 双(shuāng)波(bō)长(cháng) 450/630nm 檢測，請在(zài) 5min 內(nèi)读完數據(jù)），測定(dìng) 每孔 OD 值。