本(běn)试劑盒是(shì)應(yìng)用(yòng)ELISA技术研發(fà)的(de)藥物(wù)殘留檢測产品,與(yǔ)儀器分(fēn)析技术相比具有快(kuài)速、簡便、準确和(hé)靈敏度(dù)高(gāo)等优點(diǎn),操作(zuò)时(shí)間(jiān)僅需25分(fēn)鐘(zhōng),能(néng)減少(shǎo)工作(zuò)強(qiáng)度(dù)和(hé)操作(zuò)誤差。
實(shí)验原理(lǐ)
本(běn)试劑盒采用(yòng)間(jiān)接競争ELISA方(fāng)法,在(zài)酶标(biāo)闆微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)甲砜黴素抗原,样本(běn)殘留的(de)甲砜黴素和(hé)微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)的(de)抗原競争甲砜黴素抗體(tǐ)(抗试劑),同(tóng)时(shí)甲砜黴素抗體(tǐ)與(yǔ)酶标(biāo)二(èr)抗(酶标(biāo)物(wù))相結合,經(jīng)TMB底物(wù)顯色(sè),样本(běn)吸光(guāng)值與(yǔ)其(qí)殘留物(wù)甲砜黴素呈負相關(guān),與(yǔ)标(biāo)準曲(qū)線(xiàn)比較再乘以(yǐ)其(qí)对(duì)應(yìng)的(de)稀釋倍數,即可(kě)得出(chū)样本(běn)中(zhōng)甲砜黴素的(de)含量(liàng)。
适用(yòng)範圍
可(kě)定(dìng)性(xìng)、定(dìng)量(liàng)檢測生(shēng)鲜奶样本(běn)中(zhōng)甲砜黴素的(de)殘留量(liàng)。
1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū),置于(yú)室(shì)温(wēn)(20~25°C)平衡30min以(yǐ)上(shàng),注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。
2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆,将不(bù)用(yòng)的(de)微孔放(fàng)入(rù)锡(xī)箔袋(dài),保存于(yú)2~8°C。
3、洗涤液在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。
4、編号(hào):将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào),每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo)準品做2孔平行,並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。
5、加标(biāo)準品/样本(běn):加标(biāo)準品/样本(běn)30μL到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng),加入(rù)甲砜黴素酶标(biāo)物(wù)50μL/孔,然後(hòu)加入(rù)甲砜黴素抗试劑70μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)15min。
6、洗闆:小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜,将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn),用(yòng)洗涤液250μL/孔,充分(fēn)洗涤5次(cì),每次(cì)間(jiān)隔30s,用(yòng)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)拍干(gàn)(拍干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破)。
7、顯色(sè):加入(rù)底物(wù)液A液50μL/孔,再加底物(wù)液B液50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)10min。
8、測定(dìng):加入(rù)終(zhōng)止液50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú)450nm处(建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng)450/630nm檢測,請在(zài)5min內(nèi)读完數據(jù)),測定(dìng)每孔OD值。
結果(guǒ)判定(dìng)
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