本(běn)试劑盒采用(yòng)間(jiān)接競争ELISA方(fāng)法，在(zài)酶标(biāo)闆微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)多(duō)菌靈抗原，样本(běn)中(zhōng)多(duō)菌靈和(hé)此(cǐ)抗原競争多(duō)菌靈抗體(tǐ)（抗试劑），加入(rù)酶标(biāo)二(èr)抗（酶标(biāo)物(wù)）與(yǔ)多(duō)菌靈抗體(tǐ)結合，再經(jīng)TMB底物(wù)顯色(sè)，样本(běn)吸光(guāng)值與(yǔ)其(qí)含有的(de)多(duō)菌靈含量(liàng)呈負相關(guān)，與(yǔ)标(biāo)準曲(qū)線(xiàn)比較再乘以(yǐ)其(qí)对(duì)應(yìng)的(de)稀釋倍數，即可(kě)得出(chū)样本(běn)中(zhōng)多(duō)菌靈的(de)含量(liàng)。

适用(yòng)範圍 

可(kě)定(dìng)性(xìng)、定(dìng)量(liàng)檢測生(shēng)鲜奶样本(běn)中(zhōng)多(duō)菌靈的(de)含量(liàng)。

1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū)，置于(yú)室(shì)温(wēn)（20~25°C）平衡30min以(yǐ)上(shàng)，注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。 

2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆，将不(bù)用(yòng)的(de)微孔闆放(fàng)進(jìn)原锡(xī)箔袋(dài)中(zhōng)並(bìng)且(qiě)與(yǔ)提(tí)供的(de)干(gàn)燥劑一(yī)起(qǐ)重(zhòng)新(xīn)密封(fēng)，保存于(yú)2～8°C。切(qiè)勿冷(lěng)凍。

3、洗涤液及样本(běn)稀釋液在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。 

4、編号(hào)：将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào)，每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo)準品做2孔平行，並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。 

5  加标(biāo)準品/样品：加标(biāo)準品/样本(běn)100μL到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng)，然後(hòu)加入(rù)多(duō)菌靈抗试劑50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)30min。

6、 洗闆：小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜，将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn)，用(yòng)洗涤液250μL/孔，充分(fēn)洗涤4~5次(cì)，每次(cì)間(jiān)隔10s，用(yòng)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)拍干(gàn)（拍干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破）。 

7、加酶标(biāo)物(wù)：加入(rù)多(duō)菌靈酶标(biāo)物(wù)100μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)15min，取(qǔ)出(chū)重(zhòng)複洗闆步驟6。 

8、顯色(sè)：加入(rù)底物(wù)液A液50μL/孔，再加底物(wù)液B液50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)15min。 

9、測定(dìng)：加入(rù)終(zhōng)止液50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú)450nm处（建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng)450/630nm檢測，請在(zài)5min內(nèi)读完數據(jù)），測定(dìng)每孔OD值(若無酶标(biāo)儀，則不(bù)加終(zhōng)止液用(yòng)目測法可(kě)進(jìn)行判定(dìng))。

結果(guǒ)判定(dìng)

請利用(yòng)试劑盒專業分(fēn)析软(ruǎn)件(jiàn)進(jìn)行計(jì)算，更(gèng)便于(yú)大(dà)量(liàng)样本(běn)的(de)準确、快(kuài)速分(fēn)析（歡迎来(lái)電(diàn)索取(qǔ)）。